荧光标记生物大分子实验中，传统短波长荧光染料易受细胞自发荧光干扰，成像信噪比偏低；普通长波长荧光活化酯水解速度快，标记反应窗口窄，操作容错率低；部分 CY5 衍生染料连接臂过短，标记后会改变蛋白空间构象，影响蛋白天然活性；市面多数荧光活化酯溶解性有限，有机助溶剂添加过量易造成蛋白变性，制约活细胞荧光标记、蛋白荧光探针构建相关实验推进，亟需水解稳定、蛋白兼容性优异的 CY5 标记活化酯试剂。

试剂基础信息

CY5-NHS 花青素 5-N - 羟基琥珀酰亚胺酯属于近红外荧光活性标记染料，分子带有 NHS 琥珀酰亚胺活化酯活性端，可特异性与蛋白、多肽、氨基修饰多糖、脂质分子表面伯氨基发生共价偶联，CY5 荧光发色团发射波长处于近红外区间，自发荧光干扰低，是生物大分子荧光示踪、流式检测、共聚焦成像通用核心标记试剂。

功能特性

    氨基特异性偶联：NHS 活化酯仅靶向伯氨基位点，标记位点可控，无随机非特异性吸附标记，降低背景荧光；

    近红外低干扰成像：CY5 荧光波段远离细胞内源荧光区间，细胞、组织样本成像信噪比显著提升；

    适度水解稳定性：活化酯水解速率平缓，拥有充足操作反应窗口，新手操作不易标记失败；

    蛋白温和适配：偶联反应可在中性水相缓冲液开展，少量有机助溶剂即可完全溶解染料，不易造成生物大分子变性；

    荧光光稳定性优良：同等光照条件下荧光淬灭速率慢，适配长时间活细胞动态成像观测实验。

科研应用

    蛋白、多肽荧光探针制备：标记抗体、重组蛋白、活性多肽，构建近红外荧光探针用于共聚焦显微成像；

    流式细胞样本荧光标记：对细胞表面氨基蛋白进行荧光修饰，适配流式细胞仪多通道荧光检测分析；

    氨基修饰纳米载体标记：标记氨基化脂质体、高分子纳米球，实现纳米颗粒细胞层面荧光追踪；

    生物分子定量荧光检测：构建荧光标记标准品，用于分子相互作用荧光光谱定量分析实验。

FAQ 常见问题

Q1：CY5-NHS 花青素 5-N - 羟基琥珀酰亚胺酯溶解溶剂该如何选择？

A1：优先选用无水 DMF、DMSO 作为储存母液溶剂，标记工作液稀释采用中性无氨基磷酸盐缓冲液。

Q2：标记反应缓冲液能否添加氨基类保护试剂？

A2：氨基类物质会竞争消耗 NHS 活性基团，标记孵育体系需规避 Tris、甘氨酸等含氨基缓冲组分。

Q3：标记完成的荧光蛋白样本如何保存？

A3：避光低温分装保存，避免强光持续照射，减缓 CY5 荧光基团淬灭。

本荧光染料试剂仅允许在实验室生物标记、光谱成像科研实验中使用，不可直接接触人体各类组织样本。