定义

Cy5.5-NHS，化学名为花菁素染料Cy5.5的N-羟基琥珀酰亚胺酯（NHS ester），是一种高性能的近红外荧光标记试剂。该分子由具有共轭多烯链结构的Cy5.5荧光母体和可与伯胺高效反应的NHS活性酯基团组成，常用于蛋白、多肽或核酸的荧光衍生物制备。

功能特性

Cy5.5属于近红外荧光染料，其激发与发射波长处于组织背景荧光较弱的近红外窗口，有效降低了生物样本的自发干扰。NHS酯基团具有高度选择性，在弱碱性条件下（pH 7.2-8.5）可与目标分子中的赖氨酸残基或末端氨基发生稳定酰胺键反应。此外，Cy5.5-NHS分子带有一定的水溶性，适用于水性标记体系。

痛点解决

传统荧光染料（如FITC或罗丹明）的发射波长较短，在组织或细胞深层成像时易受血红蛋白吸收及组织自发荧光干扰，导致信噪比差。Cy5.5-NHS通过其近红外特性，显著降低了这些背景干扰，同时其NHS活性酯简化了标记流程，无需复杂活化步骤即可获得高标记率的产物。

应用优势

本试剂主要应用于生物样品的荧光标记与追踪。研究人员可将Cy5.5-NHS便捷地标记到抗体、细胞因子或纳米颗粒表面，用于构建高性能荧光探针。这些探针适用于流式细胞术、荧光显微镜及小动物活体光学成像等需要高穿透深度、低背景的研究。

FAQ常见问题

问：如何去除未反应的Cy5.5-NHS？

答：建议使用脱盐柱（如Sephadex G-25）或超滤离心管进行纯化，避免使用透析（可能因染料疏水导致非特异吸附）。有机溶剂沉淀法可能使蛋白变性，需谨慎。

问：标记后的产物出现沉淀怎么办？

答：这可能由于染料标记比例过高导致疏水聚集。可尝试降低染料与目标分子的摩尔比（建议5:1至10:1），或向缓冲液中加入少量增溶剂。

科研试剂郑重提醒：本品严禁用于任何涉及人体的操作或临床前动物实验的替代用途。