结构定义:Biotin-OVA是卵清蛋白与生物素共价结合的产物,每个OVA分子通常连接2-10个生物素(可通过HABA法测定)。OVA来源于鸡蛋清,不含有常用酶抑制剂。
基础参数:冻干粉或溶液形式,分子量约45 kDa(未修饰)。溶解于PBS或水,浓度为1-10 mg/mL。储存于-20°C,避免反复冻融。生物素化程度适中即可,过高可能影响溶解性。
核心应用:
1. ELISA中的固相抗原(场景:检测抗体或筛选血清)。原理:通过亲和素预包被板捕获Biotin-OVA,保证抗原朝向一致。用途:提高检测灵敏度与重复性。
2. 亲和纯化基质制备(场景:从混合抗体中纯化特定抗体)。原理:Biotin-OVA结合于亲和素树脂,特异性吸附抗OVA抗体。用途:获得高纯度多克隆或单克隆抗体。
3. 流式细胞术中的示踪抗原(场景:研究抗原摄取或呈递)。原理:生物素标记后可用荧光亲和素显色。用途:定位分析抗原在细胞内的分布。
注意事项:
储存:冻干粉溶解后分装,避免反复冻融。
避免使用叠氮钠保存,可能影响亲和素结合。
安全:OVA为常见过敏原,操作时注意防护。
FAQ:
1. 生物素化是否改变OVA的抗原性? → 轻度修饰保留主要表位,过度修饰可能影响。
2. 能否用于Western Blot? → 可以,但需配合链霉亲和素-HRP。
3. 与生物素化BSA的区别? → OVA和BSA序列不同,应用于不同抗体体系。
4. 如何确定生物素化程度? → 使用HABA-亲和素比色法。
5. 是否可常温运输? → 短期室温可耐受,长期保存需冷冻。
本品仅限科学研究,严禁用于人体。